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SILAC实验技术服务

  1.SILAC技术概述

  细胞培养氨基酸稳定同位素标记(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture,SILAC),这种方法首先是有2002年丹麦Mann实验室的人员对AACT技术做了进一步改进而获得,并首次应用于定量蛋白质组学研究,为全面、系统的定性定量分析复杂哺乳动物细胞蛋白质组提供了有效的解决方案。

  试验中分别用天然同位素(轻型)或稳定同位素(重型)标记的必需氨基酸取代细胞培养基中相应的氨基酸,细胞经5-6个倍增周期后,稳定同位素标记的氨基酸完全掺入到细胞新合成的蛋白质中替代了原有氨基酸。不同标记细胞的裂解蛋白质按照细胞数或蛋白量等比例混合,经分离、纯化后进行质谱鉴定。


  2.SILAC技术优势

  细胞培养时掺入标记,减小实验误差,定量更准确。

  3.流程及周期

  实验包括预实验和正式试验部分

  预实验中对酶解样品进行预实验质谱,以确定样品是否有降解发生,以及稳定同位素氨基酸标记效率。

  正式实验中对样品进行多次的正式实验质谱分析,数据库检索及差异分析,出具报告。

  全部实验周期为4周。


  4.报告内容

  word版实验报告:包括实验原理,实验流程,实验试剂仪器,实验步骤及参数,实验结果

  excel版定性定量差异数据:全部检测蛋白的登录号及名称,得分,蛋白差异量及P值,分子量、等电点、肽段数等常规信息,检测到肽段的详细信息

  生物信息学分析数据:统计学差异表达蛋白的GO,pathway,network分析报告

  RAW文件:质谱原始数据文件

  5.样品要求


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